Регина Мария Кастильо начала свою работу в качестве представителя Детского фонда Организации Объединенных Наций (ЮНИСЕФ) в Узбекистане. До этого назначения г-жа Кастильо работала представителем ЮНИСЕФ в Республике Хорватия и представителем ЮНИСЕФ в Парагвае. До вступления в ЮНИСЕФ в 2016 году г-жа Кастильо работала в качестве странового директора ЮНЭЙДС по Боливии, Эквадору и Перу, руководителя отдела по партнерству в частном секторе ЮНЭЙДС в Швейцарии и специалиста по экономическим и социальным вопросам в Исполнительном офисе Генерального секретаря ООН Кофи Аннана в США.